等度液相色譜分析儀是在經典的液相色譜法基礎上發展起來的，其以液體作為流動相，并采用顆粒極細的固定相的柱色譜分離技術。其分離機制與常規柱色譜相同，但填料更加精細，需高壓泵推動，柱效高，分析速度快。與氣相色譜不同的是液相色譜中流動相亦參與組分的分離過程，其組成、比例和pH值可靈活調節，分離模式多樣。在實際操作中主要通過改變流動相的組成來調節樣品在色譜柱的保留值和選擇性，從而使不同樣品得到分離。

色譜分析是以假定給定組分的保留值在分離條件不變時保留值恒定為基礎的。對標準的液相色譜程序而言，每個峰都對應于一個組分，以標準品與樣品中組分的保留時間相對應進行鑒別。恒定的保留時間對分析設計排列的樣品很重要。

在等度液相色譜分析儀分析中常涉及到組分的保留值。保留值發生改變可使已建立的方法不能繼續進行下去，或引起分析周期太長，或者峰分不開。應該找出引起保留值變化的原因。

除上述條件之外，引起等度液相色譜分析儀保留變化的原因主要包括下列3種：

1柱-柱之間；

2日-日或日內：保留時間可能隨時間而變化，如溫度、柱溫、pH值等對柱性能有影響，通常是所有的峰提前或延遲。

3樣品-樣品間：偶爾也有樣品與標準品的保留時間不同，可能是樣品介質的影響。

以下重點討論造成日-日間和日內保留時間變化的影響因素，它們主要是：

a分離條件控制差

除了色譜柱外，保留是溫度、流動相組成和流速的綜合體現，如果有一個條件變化，保留時間也會隨之發生變化。

b柱平衡慢

流動相組成或溫度變化時，柱在新條件下再平衡需要一定的時間，在柱達到*平衡錢不應進樣。

c柱鈍化

長時間進樣，柱會退化，強保留組分被柱不可逆的保留，導致所有組分保留減少。鍵合相層從填料微粒上剝落下來，會導致某些組分的保留增加，而另一組分的保留減少。

d柱過載和樣品介質相互作用

過大的樣品量超出柱的線性范圍，使保留減少。也可能是樣品本身過載，從其它方面影響保留